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    操作中应严格按要求洗刷ELISA试剂盒

    发布时间: 2019-07-23  点击次数: 79次

    进口ELISA试剂盒首要洗刷在ELISA过程中虽不是一个反响过程,但却也决定着试验的胜败。ELSIA就是靠洗刷来到达别离游离的和结合的酶标记物的意图。

    ELISA试剂盒洗刷液运用原则:

    1.某一项意图洗液主张运用该试剂盒内的洗液;

    2.同一elisa试剂盒洗液用完了,主张选用同一批号的洗液;

    3.同一批号的洗液也用完了,主张选用同一项意图试剂洗液;

    4.同一项意图洗液用完了,主张运用该项目其他厂家的洗液;

    5.同一项目一切厂家都用完了,主张选用同一系列项意图洗液(比如甲乙丙丁戊庚肝抗体检测,归于肝炎系列,急用时能够暂时混用);

    6.不主张国产洗液与进口洗液混用,也更不主张不同系列项意图洗液混用,这两点都是由于洗液的配置成分不同,特别是不同项意图洗液(正规试剂厂家),首要组分都不太一样。

    虽然对强阳性标本影响不是很大,但关于临界阳性阴性(灰区)标本影响较大,所以不发起不同系列项目洗液混用。

    进口ELISA试剂盒洗刷方法:

    (1)浸泡式

    a.吸干或甩干孔内反响液;

    b.用洗刷液过洗一遍(将洗刷液注满板孔后,即甩去);

    c.浸泡,行将洗刷液注满板孔,放置1-2分钟,间歇摇摆,浸泡时刻不行随意缩短;

    d.吸干孔内液体。吸干应彻底,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液体后在清洁毛巾或吸水纸上拍干;

    e.重复操作c和d,洗刷3-4次(或按阐明规定)。在间接法中如本底较高,可增加洗刷次数或延长浸泡时刻。

    微量滴定板多选用浸泡式洗刷法。洗刷液多为含非离子型洗刷剂的中性缓冲液。聚苯乙烯载体与蛋白质的结合是疏水性的,非离子型洗刷剂既含疏水基团,也含亲水基团,其疏水基团与蛋白质的疏水基团借疏水键结合,从而削弱蛋白质与固相载体的结合,并借助于亲水基团和水分子的结合作用,使蛋白质回复到水溶液状况,从而脱离固相载体。洗刷液中的非离子型洗刷剂一般是吐温20,其浓度可在0.05%-0.2%之间,高于0.2%时,可使包被在固相上的抗原或抗体解吸附而减低试验的灵敏度。

    (2)流水冲刷式

    流水冲刷法zui初用于小珠载体的洗刷,洗刷液仅为蒸馏水乃至可用自来水。洗刷时附接一特殊设备,使小珠在流水冲击下不断地翻滚淋洗,持续冲刷2分钟后,吸干液体,再用蒸馏水浸泡2分钟,吸干即可。浸泡式犹如盆浴,流水冲刷式则好比淋浴,其洗刷作用更为彻底,且也简便、快速。已有试验标明,流水冲刷式同样也适用于微量滴定板的洗刷。洗刷时设法加大水流量或加大水压,让水流冲击板孔表面,进口ELISA试剂盒洗刷作用更佳。

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